培養(yǎng)基的滅菌及影響因素
發(fā)布時(shí)間:2012-5-9 13:14
滅菌方式
分批滅菌:適于規(guī)模小的工廠和種子罐。是指培養(yǎng)基在發(fā)酵罐中用蒸氣加熱,達(dá)到預(yù)定溫度且維持一定時(shí)間后,從夾套或蛇管通冷卻水,迅速將培養(yǎng)基冷卻,并通入無(wú)菌空氣保壓,至接近發(fā)酵溫度,然后接種。這種方法不需其它設(shè)備,操作簡(jiǎn)易,其缺點(diǎn)是加熱和冷卻所需時(shí)間較長(zhǎng);相對(duì)地說(shuō)是延長(zhǎng)發(fā)酵周期,使發(fā)酵罐的利用率降低。所以,大型發(fā)酵罐采用這種方法,不甚合理,尤其發(fā)酵罐本身的 夾套或蛇管傳熱面積有限,做不到高溫度短時(shí)間的原則。
連續(xù)滅菌:適于大規(guī)模工廠,將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷進(jìn)行加熱,維持和冷卻,最后進(jìn)入發(fā)酵罐。它有很多優(yōu)點(diǎn)如:
①可以采用高溫短時(shí)間滅菌,物料、受熱時(shí)間短,減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞,有利于提高生產(chǎn)效率。
②總的滅菌時(shí)間較分批滅菌大為減少,縮短發(fā)酵罐的生產(chǎn)周期。
③蒸氣負(fù)荷均衡,提高鍋爐效率。
④適應(yīng)自動(dòng)控制。
連續(xù)滅菌的缺點(diǎn)是容易產(chǎn)生泡沫,粘度大或顆粒物料的培養(yǎng)基會(huì)造成局部滅菌不充分與管道堵塞現(xiàn)象。
影響培養(yǎng)基滅菌的幾個(gè)因素①培養(yǎng)基中污染菌的數(shù)量與滅菌時(shí)間的關(guān)系。
②培養(yǎng)基pH的影響:在pH 6.0~8.0時(shí),微生物最耐熱,不易死亡,pH<6.0時(shí),氫離子易滲入微生物細(xì)胞內(nèi),改變細(xì)胞的生理狀態(tài),促使其死亡,所以培養(yǎng)基的pH越低,所需的滅菌時(shí)間也越短。
③培養(yǎng)基成分的影響:培養(yǎng)基中所含一定濃度的糖類、油脂及蛋白質(zhì),會(huì)增加微生物的耐熱性。高濃度的有機(jī)物增加培養(yǎng)基的粘度,影響熱的傳入,應(yīng)提高滅菌溫度。而高濃度的鹽類增加滲透壓,可以促進(jìn)熱的傳導(dǎo),降低微生物的耐熱性,故易于滅菌。
④培養(yǎng)基中顆粒的影響:特別是顆粒大和結(jié)塊的傳熱效果差,滅菌就較困難,所以滅菌前必須充分?jǐn)嚢琛S袝r(shí)需提高滅菌溫度,延長(zhǎng)滅菌時(shí)間來(lái)達(dá)到滅菌的要求。
⑤泡沫的問(wèn)題:培養(yǎng)基在滅菌時(shí)產(chǎn)生泡沫對(duì)對(duì)滅菌效果有很大的影響,因?yàn)榕菽械目諝庑纬筛魺釋?,空氣的?dǎo)熱差,包裹在泡沫中的微生物就不容易被殺死(達(dá)不到受熱溫度)。因此,滅菌操作中要注意泡沫的產(chǎn)生,如果不要時(shí),可以再發(fā)酵的過(guò)程添加發(fā)酵消泡劑,起到消泡的作用,還要防止壓力驟降而起泡。
本文參考《發(fā)酵微生物學(xué)》一書(shū)。
常見(jiàn)問(wèn)題
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